在进行GPCR19激动剂（TGR5受体激动剂）相关实验时，合适的操作规程至关重要。以下是详细的步骤：

细胞准备

首先，在96孔板中每孔加入100μL细胞悬液。对于细胞增殖实验，通常每孔加入2000个细胞，而在细胞毒性实验中，每孔应加入5000至10000个细胞。具体的细胞数目应根据细胞类型、大小及增殖速度等因素进行调整。然后将细胞置于37℃及5% CO2的细胞培养箱中培养24小时。

化合物处理

接着，在每孔中添加适当浓度的0至10μL受试化合物，以进行进一步的测试。

孵育步骤

将96孔板放入37℃、含5% CO2及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当的时间，以确保化合物能够有效作用于细胞。

MTT实验步骤

随后，将5倍浓缩的MTT稀释液稀释为1倍浓度的MTT溶液。每孔添加50μL 1×MTT溶液后，在37℃下孵育4小时，以使MTT还原为甲臜。

数据处理

孵育结束后，吸出每孔的上清液，再加入150μL DMSO以使甲臜溶解，并在平板摇床上摇匀。

光密度检测

最后，使用酶标仪在570nm波长下检测每孔的光密度（若没有570nm滤光片，也可使用560-600nm范围的滤光片）。

结果分析

对于结果分析，首先计算细胞的存活率：将各测试孔的OD值减去本底OD值（即仅培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔的OD值（即仅培养基加不同浓度的受试药物并加MTT，无细胞），然后对各重复孔的OD值取平均数，并计算±SD。细胞存活率以T/C%表示，其中T为加药细胞的OD值，C为对照细胞的OD值。细胞存活率%=（加药细胞OD/对照细胞OD）×100。

药物浓度计算

最后，求出在T/C=50%时的药物浓度（即IC50）和在T/C=10%时的药物浓度（即IC90）。这将为后续的研究提供重要的数据支持。

在进行以上实验步骤时，建议参考尊龙凯时人生就博提供的技术资料和培训资源，以确保实验的准确性和可靠性。通过合理的实验设计和数据分析，我们可以更好地理解GPCR19激动剂的潜在应用，为生物医疗领域的进步做出贡献。